Enzo蛋白聚集分析试剂盒——快速、特异性和定量标记

聚集体是聚集的、错误折叠的蛋白质的包涵体，当泛素-蛋白酶体蛋白质降解机制不堪重负时形成。通常，聚集体响应细胞应激而形成，并通过分离错误折叠的蛋白质提供细胞保护机制，最终通过自噬清除它们。此外，蛋白质聚集体的形成是多种人类疾病的标志，例如阿尔茨海默氏症、帕金森氏症、肌萎缩侧索硬化症或酒精性肝病。

艾美捷 Enzo蛋白聚集分析试剂盒提供了一种快速、特异性和定量的方法来标记细胞中的聚集体，无需人工蛋白质突变。

艾美捷 Enzo蛋白聚集分析试剂盒包含的 PROTEOSTAT ® Aggresome 检测试剂是一种分子转子染料。在溶液中，沿单个中心键的自由分子内旋转可防止荧光。PROTEOSTAT® _染料特异性地插入到通常存在于错误折叠和聚集的蛋白质中的四元蛋白质结构的交叉β脊柱中，这将抑制染料的旋转并导致强烈的荧光。

艾美捷 Enzo蛋白聚集分析试剂盒特点：

1、提供基于细胞的药物反应性测定，以在真实的细胞环境中鉴定与神经退行性疾病相关的抑制剂

2、可靠且简单的测定不需要非生理性蛋白质突变或基因工程细胞系

3、在广泛的条件下进行验证，并使用小分子调节剂证明适用于筛选具有潜在治疗价值的化合物

4、固定细胞检测针对抗体共定位研究进行了优化

5、通过流式细胞术轻松量化聚集体和相关包涵体

6、可用于神经退行性疾病、肝病、毒理学研究等的研究

PROTEOSTAT ®染料已在各种条件下和小分子调节剂得到验证，证明其适用于化合物筛选。此外，它适用于多重共免疫荧光，以在自噬和聚集体形成的背景下研究您感兴趣的目标。

图：用试剂处理 K562 细胞以诱导 ER 应激和不完全自噬，分别使用 Thapsigargin (Tg, 0.1 µM)、25、50 和 75 µM CQ处理 24 小时。使用蛋白酶体抑制剂 MG-132 (5 µM) 进行阳性对照 24 小时。沉淀的细胞被固定和透化。然后根据说明使用 300 µl PROTEOSTAT® Aggresome Detection 试剂（Enzo Life Sciences）和 1 µg/ml DAPI（用于细胞周期测定）在室温下将细胞标记 30 分钟。测定每种处理的 S 期 G1 以上和 G2m S 期以上的聚集倾向因子 (APF) 的相对增加，并与对照值进行比较。与对照组相比，ER 应激诱导剂、Tg 和 50 µM CQ 在 S 期比 G1 更能上调聚集体。