Columbia Biosciences 萤火虫萤光素酶细胞活力检测

Columbia Biosciences艾美捷SureLight Glow 萤火虫荧光素酶细胞活力测定提供了一种均相且高度灵敏的方法，用于在细胞培养物中量化 ATP（细胞活力的指标）。该测定产生稳定的发光型发光信号，该信号与细胞培养物中存在的活细胞数量成正比。SureLight Glow 达到或超过领先竞争对手的规格和性能，成本节省超过 40%。

 Columbia Biosciences艾美捷SureLight Glow 萤火虫荧光素酶细胞活力测定试剂盒组分：

1.萤火虫萤光素酶（冻干）

2.D-荧光素（冻干）

3.裂解缓冲液（冷冻）

Columbia Biosciences艾美捷萤火虫萤光素酶细胞活力检测试剂制备：

1.解冻缓冲液；平衡至室温

2.用缓冲液重构冻干酶/底物

3.通过涡旋或轻轻颠倒混合

Columbia Biosciences艾美捷萤火虫萤光素酶细胞活力检测方案：

1.在培养基中制备含有哺乳动物细胞的不透明壁多孔板（例如，对于 96 孔板，每孔 100 µl）

2.制备含有无细胞培养基的对照孔

3.将测试化合物添加到实验孔中并根据细胞培养方案进行孵育

4.在室温下平衡板及其内容物，大约 15-30 分钟

5.在每个孔中添加与含有细胞的培养基体积相等的细胞活力试剂（例如，100ul 试剂加入 100ul 细胞培养基）

6.在轨道振荡器上混合内容物以诱导细胞裂解

7.让板在室温下孵育 5-15 分钟以稳定发光信号

8.在光度计上读取结果

左：活细胞数量与发光信号的相关性。在 100 µl RPMI-1640/10% FBS 培养基中制备两倍连续稀释的 THP-1 细胞（每孔 50,000 至 49 个细胞）。向每个孔中加入 100 µl 试剂，反应在室温下孵育 15 分钟。在发光计上测量发光信号并以相对光单位 (RLU) 表示。

右：发光信号随时间的稳定性。将等量 (100 µl) 的细胞活力试剂添加到 100 µl RPMI1640/10% FBS 培养基（活细胞）中的 50,000 个 THP-1 细胞中或仅添加到培养基（对照；无细胞）中。在发光计上的指定时间段内每 10 分钟监测一次发光信号。

Columbia Biosciences相关研究：

SureLight® 铕胺反应性标记试剂盒  AD-EU-ITC-100

Cyclic AMP TR-FRET 试剂盒，1000 次测试  AD-cAMP-1K