最全精编分子生物学实验方法集锦出炉，0基础小白也能秒变实验高手！

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大家平常在进行实验时，常常会因为找不到正确的实验方法而苦恼。为助力科研，深圳微科盟收集整理了一系列实验指导的资料，希望可以作为参考方法，帮助科研人员省时省力作出满意的实验结果！无需转发，无需助力，直接领取！文末有具体的免费领取方式哦！

目录

1. 基因组 DNA 提取   

1.1. 酵母、细菌基因组 DNA 提取   

1.2. 真核细胞 DNA 的制备与定量  

1.3. DNA 片段回收与纯化 冻融法

1.4. 琼脂糖凝胶的特点  

1.5. 琼脂糖核酸电泳  

2. 聚合酶链式反应(PCR)  

2.1. PCR 概述  

2.2. PCR 引物设计黄金法则  

2.3. PCR 反应体系  

2.4. PCR 反应的重要因素  

2.5. PCR 反应条件的选择  

2.6. PCR 常见问题总汇  

2.7. 减少 PCR 产物中引物二聚体的方法

2.8. pfu特性 FAQ  

2.9. 增加 PCR 特异性的方法  

2.10. 反向 PCR(染色体步移)    

2.11. PCR 污染与对策  

2.12. PCR 产物纯化方法(酚/氯仿)    

2.13. 大肠杆菌菌落 PCR  

2.14. 酵母菌落 PCR  

2.15. 胶回收纯化 DNA

2.16. PCR 技术片段拼接的 SOE 和 SDL 方法  

2.17. SOE-PCR，Fusion-PCR FAQ  

2.18. 聚合酶链反应一单链构象多态性分析 (PCR-SSCP)  

2.19. 用 Fusion PCR 构建基因片段

3. 载体 DNA 的提取、鉴定与相关操作  

3.1. 质粒概述  

3.2. 质粒快速鉴定  

3.3. 质粒 DNA 的小量制备(20 μl)  

3.4. 质粒 DNA 的大量制备(3 mL)    

3.5. λ噬菌体 DNA 提取

3.6. 酶切  

3.7. 单酶切  

3.8. 单酶切方向问题：注意！   

3.9. 双酶切  

3.10. KpnI+BamHI  

3.11. XbaI+BamHI  

3.12. 连接  

3.13. 酶切产物的乙醇沉淀方法  

4. TA 克隆、亚克隆、克隆相关

4.1. 目的基因的亚克隆  

4.2. T4 DNA 连接酶 FAQ  

4.3. PCR 产物的克隆  

4.4. 外源 DNA 和质粒载体的连接反应  

4.5. 克隆 PCR 产物 FAQ  

4.6. 连接反应心得  

4.7. DNA 重组实验  

4.8. pfu 的 PCR 产物加 A 尾巴以便于 T 载体连接及 pMD-18T 连接体系

5. 感受态细胞的制备、转化及转化子的筛选与鉴定  

5.1. 大肠杆菌化学法感受态细胞的制备及转化  

5.2. 大肠杆菌化学法高效率感受态细胞的制备(详细的)  

5.3. 大肠杆菌电转化感受态细胞的制备及转化  

5.4. 重组子的筛选和鉴定  

5.5. 酵母电转化感受态细胞制备及转化

5.6. 不带抗性的酵母营养缺陷型的富集与筛选  

5.7. 毕赤酵母电转化方法  

5.8. 电击杯处理

5.9. 真核转染  

5.10. PDS-1000 基因枪操作手册  

6. 基因敲除、定点突变，与定向进化  

6.1. 一种可重复利用的酵母基因敲除方法  

6.2. 自杀质粒  

6.3. 基于 DpnI 的定点突变方法  

6.4. 基于 PCR 的定点突变实例  

7. 核酸与蛋白质杂交技术  

7.1. Southern 杂交(一)

7.2. Southern 杂交(二)  

7.3. Northern 杂交(一)  

7.4. Northern 杂交(二)  

7.5. Western 杂交(一)    

7.6. Western 杂交(二)    

7.7. 抗体制备技术的选择  

7.8. 原位杂交技术简介  

7.9. 原位杂交组织化学常用试剂及处理  

7.10. 荧光原位杂交(FISH)    

8. 酵母双杂交技术  

8.1. 酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用

8.2. 酵母双杂交系统的发展和应用  

8.3. LexA 酵母双杂交系统操作方法  

8.4. 酵母双杂交系统的建立与发展  

8.5. 酵母双杂交系统研究及其应用  

8.6. 酵母双杂交实验 FAQ  

9. RNA                                                     

9.1. RNA 操作中的一般要求  

9.2. 蛋白酶 K 替代 DEPC 的系统方法  

9.3. 总 RNA 的提取(Trizol 法提取)    

9.4. 一种快速鉴定 RNA 质量的方法  

9.5. 组织和细胞 RNA 的制备  

9.6. 哺乳动物细胞总 RNA 的分离  

9.7. mRNA 的分离与纯化

9.8. RNA 质量的确定  

9.9. RNA 酶保护试验  

9.10. mRNA 差别显示技术

9.11. RT-PCR 简介  

9.12. RT-PCR 引物设计原则和方法  

9.13. RT-PCR  

9.14. RT-PCR 经验  

9.15. 荧光 PCR 原理  

9.16. RNAi 实验原理与方法

9.17. RNAi 技术新突破：根据 SNP 选择性沉默突变基因  

9.18. RNAi：制备 siRNAs 的方法  

9.19. dsRNA 和 RNA 干扰技术  

10. 蛋白质异源表达、分离、纯化与鉴定  

10.1. 原核表达  

10.2. 原核表达的插入位点问题  

10.3. 工程菌发酵  

10.4. 细胞破碎  

10.5. 蛋白含量测定方法  

10.6. 包涵体复性

10.7. 重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量

10.8. 表达蛋白的 SDS-PAGE 电泳分析  

10.9. 选择材料及预处理  

10.10. 蛋白质的分离纯化

10.11. 细胞的破碎  

10.12. 浓缩、干燥及保存  

10.13. 细菌蛋白质的透析体会  

10.14. 表达蛋白的分离与纯化  

10.15. 蛋白质提取方法例子  

11. 蛋白质组学  

11.1. 蛋白质组技术的研究进展  

11.2. 蛋白质组学及研究技术路线  

11.3. 电泳技术简介  

11.4. 等电聚焦电泳  

11.5. 双向电泳的样品的制备  

11.6. 双向电泳操作步骤

11.7. SDS-PAGE 胶染色  

11.8. 双向电泳蛋白点的切取和保存  

11.9. 数据库搜索(Databases search)  

11.10. 主要的公共数据库及网址  

11.11. 双向电泳常见问题与原因  

11.12. 蛋白质的序列分析流程  

11.13. 聚丙烯酰胺凝胶的配制  

11.14. 双向电泳常用溶液配方

12. 光滑球拟酵母相关参数测定  

12.1. 细胞干重  

12.2. 丙酮酸酶法测定方法

12.3. 丙酮酸和α -KG 浓度 HPLC 测定方法  

13. 微生物生理  

13.1. 细菌的生物化学试验  

13.2. MTT 法实验原理与 MTT 溶液的配制方法  

13.3. 酵母菌分类  

13.4. 细胞凋亡的分子生物学检测方法

13.5. 液体培养中细胞凋亡(PCD)过程的监测

14. 哺乳动物细胞及动物实验

14.1. 真核细胞的转染  

14.2. 转染细胞的稳定筛选  

14.3. 肿瘤细胞体外传代培养及保种  

14.4. 肿瘤动物模型的建立

14.5. 小鼠尾静脉注射方法

14.6. 肿瘤蛋白疫苗预防性动物实验  

14.7. 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养  

14.8. 实验动物免疫方案  

14.9. 血清制备  

14.10. ELISA  

14.11. 血清学筛选克隆新抗原/新基因  

14.12. ELISPOT

14.13. 藻酸盐包裹实验  

14.14. 重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作(细菌内同源重组 AdEasy System)  

14.15. 免疫组化染色

14.16. 流式细胞仪常用的几种检测方法

14.17. 人肿瘤抗原的识别与鉴定－免疫沉淀实验流程

15. 附录-试剂配方

15.1. 常用贮液与溶液  

15.2. 温度对常用缓冲液 pH 的影响  

15.3. pH 计的使用方法  

15.4. 电泳缓冲液、染料和凝胶加样液  

15.5. 常用溶剂与水的共沸物数据  

15.6. 不同温度下常见无机化合物的溶解度  

15.7. 实验室常用技术参数资料

15.8. 常用酶的配制  

15.9. 杂交试验中用于降低背景的封闭剂  

15.10. 常用凝胶的技术参数

15.11. 遗传密码表

15.12. 常用酸碱技术参数  

15.13. 20 种标准氨基酸的命名及性质  

15.14. 常见的 E.coli End-和 End+菌

15.15. 常用质粒和粘粒载体的复制起始点和拷贝数  

15.16. 麦氏浊度计标准管配制方法

15.17. 常用培养基

15.18. 常用缓冲溶液  

15.19. 常用抗生素  

15.20. 细胞化学和细胞组分分离溶液  

15.21. 细胞培养和细胞融合溶液  

15.22. 制备电镜标本的溶液  

15.23. 显影、定影溶液

15.24. 微生物学实验常用染色液的配制

15.25. 实验用水

15.26. 各种核酸材料的贮存

15.27. 分子生物学人员常用数据库  

15.28. GeneBank 概览

15.29. 分子生物学人员常用软件

15.30. 分子生物学实验中的细节问题和小技巧

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