二甲双胍(metformin)在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞(RAW 264.7)中免疫调节作用的研究 AbMole

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脓毒症是一种由宿主对感染的不受控制的免疫反应引起的严重疾病,是全球发病率和死亡率的主要原因。脓毒症的复杂进程包括一个初始的过度炎症阶段,随后是一个隐蔽的免疫抑制阶段。

尽管有证据表明,二甲双胍在脓毒症管理中具有潜在的抗炎作用,但其在相关剂量下的免疫保护机制尚不清楚。巨噬细胞在脓毒症过程中起着不可或缺的作用,它们容易受到功能障碍的影响,这是导致免疫抑制的主要病因因素。

本研究中用到的 N-acetyl-L-cysteine (NAC), tert-butyl hydroperoxide (TBHP) 和 metformin 都购自 AbMole生物,纯度高,效果好,大量引用文献验证。

Acetylcysteine (NAC) | 616-91-1 | 美国AbMole | N-Acetyl-L-cysteine; NAC; N-acetylcysteine; N-Acetyl-Cysteine

tert-Butyl hydroperoxide | 75-91-2 | 美国AbMole | tert-Butyl hydroperoxide solution

Metformin hydrochloride | 1115-70-4 | 美国AbMole

研究中,使用RAW 264.7小鼠巨噬细胞系作为模型,通过LPS诱导炎症反应和免疫抑制。细胞暴露于相关浓度的二甲双胍(0.04 mM),并进行细胞毒性、细胞因子(TNF-α和IL-6)分泌、AMPK活性、ROS产生等测定。

为了探究AMPK在二甲双胍效应中的作用,进行了AMPK活性测定,并使用siRNA技术敲低AMPK。同时,还使用了ROS荧光染料DCFH-DA来评估ROS水平,并使用TBHP(ROS诱导剂)和NAC(ROS清除剂)来进一步研究ROS在二甲双胍免疫调节作用中的作用。

研究结果表明,二甲双胍显著降低了LPS诱导的TNF-α和IL-6的分泌,抑制了过度炎症反应。二甲双胍还防止了LPS诱导的免疫抑制,这通过增加LPS再刺激时的炎症介质分泌得到证实。

AMPK活性测定和siRNA实验表明,二甲双胍的免疫调节效应不是通过AMPK途径介导的。二甲双胍通过调节细胞内ROS水平来抑制过度炎症和免疫抑制,这一机制与AMPK活性无关。使用TBHP和NAC进一步证实了二甲双胍通过ROS依赖的机制发挥其免疫调节作用。

因此,二甲双胍的免疫调节作用可能为脓毒症的处理提供新的解决途径,尤其是在调节ROS水平方面。未来的研究需要深入探讨二甲双胍如何通过调节ROS水平来影响脓毒症的免疫反应,以及二甲双胍在脓毒症不同阶段的潜在应用。

鸣谢:《The immunomodulatory efects of metformin in LPS‑induced macrophages: an in vitro study》

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